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NobleRyder 成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液

  • 型   號:D6103
  • 價   格:
  • 更新時間:2024-09-23
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

NobleRyder 成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液(四環(huán)素法) 即用型液體試劑 D6103-2×10ml

成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液(四環(huán)素法)

產(chǎn)品簡介:

在成骨分化過程中,其最基本的生物學(xué)特征是骨基質(zhì)合成、分泌、礦化及成熟,而礦化結(jié)節(jié)是成骨細(xì)胞分化成熟的標(biāo)志,同時也是成骨細(xì)胞行使成骨功能的主要形態(tài)學(xué)表現(xiàn),觀察成骨細(xì)胞的礦化結(jié)節(jié)是研究成骨細(xì)胞分化的常用手段之一。 成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色常用方法有四環(huán)素法和茜素紅S法,四環(huán)素染色法是利用四環(huán)素與礦化結(jié)節(jié)中的鈣鹽形成熒光的磷酸復(fù)合物,可用熒光顯微鏡觀察。

NobleRyder 成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)染色液

產(chǎn)品組成

編號

名稱

D6103

3×10ml

Storage

試劑(A):四環(huán)素溶液 

10ml

-20℃避光

(B):Ob固定液

30ml

4℃避光

試劑(C):DAPI染色液

10ml

-20℃避光

使用說明書

1份

 

 

自備材料:  

1、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS,無鈣鎂)

2、培養(yǎng)基

3、蒸餾水

4、熒光顯微鏡

 

 

操作步驟(僅供參考):

1、成骨細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng),yi酶消化,接種培養(yǎng)于6孔板中,每孔有1x105個細(xì)胞。

2、培養(yǎng)基中添加1%-2%四環(huán)素溶液,細(xì)胞連續(xù)觀察、換液,培養(yǎng)14天。

3、小心吸除培養(yǎng)液,磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2次。

4、加入足量Ob固定液固。

5、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2。

6、加入DAPI染色液染色5-8min。

7、輕輕吸除染色液,用磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2次,每次。

8、直接在熒光顯微鏡快速觀察,或抗熒光封片劑封片后再觀察。

 

 

染色結(jié)果:

鈣結(jié)節(jié)

粉紅色

 

 

注意事項(xiàng):

1、四環(huán)素溶液為無菌溶液,可以一次性分裝小份保存,注意避免染菌;使用時常溫溶解后與培養(yǎng)基按1:100比例混合后使用。

2、Ob固定液宜揮發(fā),開啟后應(yīng)密封保存。

3、DAPI染色后應(yīng)盡快觀察,以免熒光消失,影響觀察。也可以用抗熒光淬滅封片劑處理。

4、DAPI不宜反復(fù)凍融,否則容易失效。且對人體有一定刺激性,請注意做好防護(hù)。

5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

 

有效期:6個月有效。

 

 

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